第10回 リレー講演より「日常遭遇する特異検体の解析」
（９）
EDTA沈殿物のWestern Blotting分析
次に、EDTA沈澱物を洗浄後、western blotting分析を行い観察してみました。その結果をスライドに示します。患者ＩgＧ型Ｍ蛋白は2-mercaptoethanol（以下2-ME）処理前で分子量約155,000、2-ME処理後では、矢印で示した如く、Ｍ-蛋白を構成するγ鎖は分子量約53,000、κ鎖は27,000とほぼ正常のＩgＧ
2
の分子量と一致することが確認されました。
以上のように、本例のＩgＧ
2
型Ｍ蛋白は、EDTAおよびクエン酸ナトリウムで白濁沈澱し、ヘパリンでは変化を認めなかったことから、Ｍ蛋白とキレート試薬との反応が強く示唆されます。また､EDTAはCa
2+
やMg
2+
などの2価金属イオンとキレート化合物をつくることが知られていますが、EDTA沈澱物を洗浄後、免疫電気泳動を行ってみますと、ＩgＧ型Ｍ蛋白以外の蛋白成分は全く観察されなかったことから、ＩgＧ同士の結合が考えられるとともに、EDTAが橋渡し的作用をしている可能性が高いと思われます。
現在、その結合様式については検索中ですが、このようなキレート試薬と反応するＭ蛋白例の報告は未だなく、本例が最初と思われます。
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